293细胞是什么细胞?293细胞和293T细胞的特点

作者：Magigen

293细胞和293T细胞

什么是293细胞？

293细胞是人肾上皮细胞系，在英文中被称为"293 cells"，它们源自人的肾上皮细胞，是从人的胚胎肾细胞（human embryonic kidney cells）中衍生出来的一种细胞系。在英语文献中，293细胞通常被描述为 "a human embryonic kidney cell line"，或简称为 "HEK 293 cells"。其极少表达细胞外配体所需的内生受体，且比较容易转染，是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株。

人的胚胎肾细胞有多种衍生株，比如HEK293，293T/17等，来源都是人胚胎肾细胞。这种细胞系在分子生物学和生物技术研究中非常常用，因为它们易于培养并且能够高效表达外源基因。

什么是293T细胞？

293T细胞由293细胞通过基因技术派生出的细胞系，293T经过腺病毒E1A基因的转染，能表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区。许多真核表达载体，如pcDNA3.1，中含有SV40病毒的复制起始位点，可以在表达SV40病毒T抗原的细胞系中复制，从而提高外源基因的表达水平。

293细胞和293T细胞的形状

图1. 293细胞和293T细胞的形状

293T细胞的用途

293T细胞广泛应用于病毒包装。用磷酸钙转染效率可高达50%。蛋白表达水平高，转染后2-3天用碱性磷酸酶分析，可以比较容易地检测到表达的蛋白。瞬时转染293T细胞是过表达蛋白并获得细胞内及细胞外（分泌的或膜）蛋白的便捷方式。如果采用Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles（Cas9/sgRNA NPs）进行转染，效率可以高达50-100%，甚至是一些比较难转染的细胞，例如原代细胞、肿瘤细胞等。

293细胞和293T细胞的特点

种属	人，不是鼠
来源	293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系, 293T细胞由293细胞派生, 同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
形态特点	上皮细胞
致瘤性	有
产物或抗原	大T抗原
染色体核型	亚三倍体人细胞系。染色体众数为64，30%的细胞有64 条染色体。4.2%的细胞染色体数目更多。多数细胞der⑴t（1;15） (q42;q13），der⒆t（3;19） (q12;q13），der⑿t（8;12） (q22;p13），还有四条标记染色体，有的细胞另有5条标记染色体。der⑴与M8 (or Xq+）常常成对出现。N17 与 N22各有四条。值得注意的是多数细胞有三条X染色体，两条Xq+，一条Xp+。
生长特性	粘附
文献评价	293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒（Ad 5） DNA的永生化细胞。[RF32725] 表达转染的腺病毒5的基因。[RF32725] 早期报道认为此细胞含有Ad 5基因组左端和右端[RF32764]，现已清楚仅含有左端序列。[RF50113] 此细胞系人腺病毒滴度高。室温不贴壁，37℃几日后重新贴壁。表达由整合素beta-1 亚基与玻基结合素受体 alpha-v 亚基组成的玻基结合素细胞表面受体. [RF33793] The Ad5 insert was cloned and sequenced,and it was determined that a colinear seqment from nts 1 to 4344 is integrated into chromosome 19 （19q13.2）.
传代	293：弃培养基，含0.25% 胰酶，0.03% EDTA 消化液洗涤，弃去，加1-2ml消化液室温或37℃消化。加入新鲜培养基，吸出，分到新培养皿中。一传二至一传四。 293T：生长快，通常倍增时间不到一天。每3~4 天1：10至1：20稀释，5% CO2条件下培养。细胞贴壁疏松，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶过度消化。
培养基更换	每2-3天一次
冻存液	95%培养基；5%,DMSO；culture medium 95%; DMSO,5%；50%培养液，10%DMSO, 40%血清。
培养条件	ATCC培养基：90%的MEM Eagle，加入2mM L-谷氨酰胺，1.5g/L碳酸氢钠，0.1 mM必需氨基酸，1.0 mM 丙酮酸钠；10%加热灭活的马血清 37℃培养