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美格RT-PCR耐热逆转录酶/反转录酶II-100µl-RNA病毒检测-PCR原料
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美格RT-PCR耐热逆转录酶/反转录酶II-100µl-RNA病毒检测-PCR原料 
编号: A001S
规格: 100µl/支
储存条件: 液体,存储于-20℃
优惠价格:
498.00
市场价: 560.0
品牌: Magicscript
产品详情

PCR试剂盒/PCR原料/分子RT酶IVD原料

RT-PCR逆转录酶/MMLV反转录酶

【产品名称】Magigen Magicscript 耐热逆转录酶 II

【产品编号】A001S

【包装规格】20,000U


【产品内容】

组份   体积
5× Reaction Buffer 11 ml×1 支
耐热逆转录酶 II(200 U/µl)100 µl×1 支
100 mM DTT   250 µl×1 支
ddH2O   1.5 ml×1 支


【美格RT酶的优点和特性】

本产品为基因重组技术克隆表达的莫洛尼鼠白血病病毒(Moloney Murine Leukemia Virus) 逆转录酶 (MMLV Reverse Transcriptase)。Magigen Magicscript 耐热逆转录酶 II 在降低了 RNase H 活性的基础上,同时进行了特异性的改造,增加了该产品对温度的适应区间(更高的热稳定性和更长的半衰期)。


【逆转录酶活性定义】

以 Poly (rA)为模板,Oligo (dT)为引物,在 37℃条件下,10分钟内催化 1 nmol dTTP 掺入所需酶量定义为 1 Unit。


【逆转录酶储存条件及有效期】

-20℃密封保存,有效期 12 个月。

【美格RT-PCR逆转录酶使用方法】

使用示例(First Strand cDNA 合成):

反应体系体积(μl)
耐热逆转录酶 II1
5× Reaction Buffer 14
100 mM DTT(建议终浓度为 10 mM)2
RNase inhibitor(20-40 U/µl)1
dNTP 混合物(各 25 mM)1
引物10μM-250μM
模板1 pg-100ng
补充 ddH2O至终体积20-25


RT-PCR反应步骤:

1. 轻柔混匀反应体系;

2. 建议反应程序:

温度时间
25℃12min
45℃30min
85℃2min


注 1:仅在使用 Random hexmers 时需要此步骤;

应用:所得的 cDNA 可直接用于 2nd-Strand cDNA 合成或者 PCR扩增。

热失活:80℃ ,20 min。

酶储存液:150 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl (pH7.6), 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% NP-40,50% Glycerol。


注意:

1. Magicscript 耐热逆转录酶 II 最适温度区域为 37-45℃,超过45℃(低于 65℃),随着温度升高,残留活性会相应下降,但依然能保持至少 70%的活性;其 RNaseH 活性为野生型 MLV 的三分之一;

2. 如需使用本产品进行一步法 RT-PCR实验,建议在研究人员已有的完整 PCR体系(已包含模板和特异引物等组分)中补充如下组分:

反应体系体积(μl)
耐热逆转录酶 II1
RNase inhibitor(20-40 U/µl)1
终体积20-25


建议RT-PCR反应程序:

45-50℃15 min
PCR 程序


研究人员在反转录复杂模板时可以提高反应温度以获得较佳的实验结果,同时可以根据实验设计自行优化各项参数或使用研究人员自行摸索的反应体系


热销Magigen逆转录酶价格

RT-PCR逆转录酶产品名称编码规格出厂价格
Magicscript 耐热逆转录酶 II 500A001M500µl1980
Magicscript 耐热逆转录酶 II 100A001S100µl498
Magicscript 逆转录酶 II Plus 500A011M500µl2320
Magicscript 逆转录酶 II Plus 100A011S100µl580
Magicscript RNA酶抑制剂 500A002M500µl1280
Magicscript RNA酶抑制剂 100A002S100µl320
Magicscript 耐热逆转录酶 III 500A003M500µl6320
Magicscript 耐热逆转录酶 III 100A003S100µl1580
一步法RT-qPCR预混液 100TA005S100T798
一步法RT-qPCR预混液 1000TA005M1000T5480
一步法RT-qPCR预混液II 100TA014S100T798
一步法RT-qPCR预混液II 1000TA014M1000T5480
Rnase H(E.coli) 250UA004S250U320
Rnase H(E.coli) 2500UA004M2500U2240
耐热核酸内切酶 Rnase HII 250UA006S250U1299
耐热 Rnase HII 2500UA006M2500U8999


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