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美格生物T7核酸内切酶I | T7 Endonuclease I 6250U
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美格生物T7核酸内切酶I | T7 Endonuclease I 6250U 
编号: C007L
规格: 6250U/盒
储存条件: 存储于-20℃、干燥、避光条件
优惠价格:
8999.00
市场价: 9800.0
品牌: Magigen
产品详情


Magigen T7核酸内切酶I, 提供OEM服务,专业厂家生产.


【 产品编号】C007L

【 产品名称】Magigen T7核酸内切酶 | T7 Endonuclease I 蛋白


名称规格试剂价格
货号试剂购买
T7核酸内切酶I / T7 Endonuclease I 250U25μl549
C007S
详细
T7核酸内切酶I / T7 Endonuclease I 1250U125μl2199C007M详细
T7核酸内切酶I / T7 Endonuclease I 6250U625μl8999C007L详细


T7核酸内切酶I用途 】本产品用于基于基因编辑技术平台的相关研究


【 包装规格】6250 U

【 T7核酸内切酶I价格 】8999元


【 产品内容 】

产品组成 C007L
10×T7 Endonuclease I Reaction Buffer1 ml×2支
Magigen T7 Endonuclease I 蛋白(10U/µl) 625 µl


T7核酸内切酶I作用

T7核酸内切酶I | T7 Endonuclease I 识别并切割不完全配对 DNA、十字型结构 DNA、Holiday 结构或 DNA分叉点、异源性 DNA;同时能以缓慢的速度切割带有切刻缺口的双链 DNA。该酶切割错配位点 5’端的**、第二或第三个磷酸二酯键。本产品可用于基因突变、SNP、TALEN 或CRISPR/Cas9 形成的突变体检测,识别错配 DNA,分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA;检测异源性二聚体或切刻 DNA;用于随机切割线性 DNA 进行 Shot-gun 克隆等。


【 活性定义 】

在 50 µl 反应体系,37℃条件下,1 小时将 90%以上的 1µg 超螺旋十字型结构的 pUC(AT)* 转化成 90%以上的线性结构所需要的酶量定义为一个活性单位。


【储存条件及有效期】

本产品于-20℃密封保存,有效期 12 个月。


T7核酸内切酶I使用方法 】

1. PCR 扩增带有错配位点的 DNA 片段

   1.1 PCR 反应使用以下两个模板进行:

        来自靶向细胞的 gDNA(如 Cas9 或 TALEN 转染细胞);

        来自阴性对照细胞的 gDNA(例如非特异性 DNA 转染细胞);

        以 100 ng 转染后的细胞基因组 DNA 为模板,建议扩增片段长度为 1kb 左右。设计引物时, 使突变位点不要在片段中间。

   1.2 使用商业产品或其他方法纯化 PCR 产物,同时准确定量。 *1

2. T7 Endonuclease I 酶切反应

   2.1 根据下表配置反应体系:

       

PCR Products 200 ng
10×reaction buffer 2 µL
Nuclease-free Water To 19 µL


    2.2 根据下述条件对 PCR 产物进行退火:

初始变性 95°C 5min
退火95-85°C -2°C/s
85-25°C -0.1°C/s

4℃


    2.3 在退火产物中加入 1µl T7 Endonuclease I,37℃孵育 15min。

    2.4 将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。 *2

         1. 如无需计算突变率,仅进行突变检测,PCR 产物可直接进行退火,如果未进行纯化或提取,建议直接加入酶切反应中的

             PCR产物体积不超过 5µL;

         2. 反应结束后如需长期保存产物,需加入终浓度 20mM EDTA 终止反应,室温存放 30min 后,会开始出现非特异切割现象。

备注:

T7 Endonuclease I 是一种底物结构选择性的酶,该酶针对不同的 DNA 底物展现出不同的切割活性。因此,切割特定底物时,必须摸索并控制好酶的用量和反应时间:

反应温度超过 42℃,反应时间超过 30min,酶量使用过大均会出现非特异核酸酶的活性;

反应温度超过 55℃,酶活显著下降。


Magigen Magicscript T7核酸内切酶购买指南

1. T7核酸内切酶I价格

   T7核酸内切酶价格会随外汇汇率的波动而变化,请以实际价格为准。

2. T7 Endonuclease运输

   T7核酸内切酶价格是产品含税价格。没有包含运费等其他费用。有些产品需要采用干冰运 输方式,请在购买前咨询运费、是否支持干冰运输等事宜。

3. T7核酸内切酶I图片仅供参考,请以实际为准。

美格生物是T7核酸内切酶专业生产厂家, T7核酸内切酶购买咨询热线:18027152056



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