干眼症患者泪腺液和泪液蛋白质组学分析

干眼症是一种泪液分泌障碍眼病，是由多种因素造成，症状以眼睛干涩为主。

了解干眼症病理生理学（DED），必须要表征在眼球表面的液体蛋白，包括泪液（tear fluid，TF）和泪腺液（lacrimal　fluid，LF）。有一些TF蛋白的报道，但很少有蛋白质组学研究从泪腺（LG）分泌的LF。因此，我们用液相色谱质谱法对构成TF和LF的蛋白质进行了表征。

TF和LF从非Sjögren DED综合症患者和健康受试者收集。通过蛋白质分析和无标记定量，确定了1165个来自TF和1448的蛋白来自LF。

总共有849种蛋白共存于TF和LF中。其次，采用多反应监测，在17个DED患者和17例健康对照组的TF和LF中，验证了候选生物标志物。

结果，16个标记的蛋白质被识别（均价变化 > 1.5，P值 < 0.05），其中，在TF中，3例上调，在LF中，8例上调，5例下调。

总之，通过深入的蛋白质组学分析和比较TF和LF蛋白，本研究揭示了新DED标记源自LG和眼泪。

分析人体体液对于确定病因和诊断疾病的生物标记物是很重要的。这些体液所携带的大量异质成分代表了治疗干预的丰富信息来源。在液体活检的来源中，代表眼部液体的泪液（TF）并不经常使用，但它是一种很好的非侵入性调查的来源，因为它易于评估和清楚，并且显示出有限的细菌污染。因此，TF已用于诊断各种眼部及全身疾病如青光眼、干眼症（DED）、甲状腺相关眼病、糖尿病和癌症。

此前，一些研究已经提出了TF的蛋白质组学分析，从患者的情况。虽然大多数TF在泪腺产生（LG），但是眼表上皮细胞、间质细胞免疫细胞，与睑板腺腺泡细胞也是TF的组成部分。然而，泪腺的液体（LF），与TF是有区别的，是一种**由LG直接分泌的水溶液。因此，有必要了解TF和LF之间蛋白组成的差异，以更好地评估眼表和其他部位的病理状态。然而，很少有人研究和比较LG流体蛋白质组与TF蛋白质组学。

本研究的目的是通过高分辨率的精确质谱法（MS），和有针对性的多反应监测（MRM）检测，描绘人的LF和TF的蛋白质谱。此外，通过比较正常和DED组之间的TF和LF个别蛋白质组，我们研究了特定疾病的生物标志物将来的方式。

在这项研究中有三个重要的发现。

首先，我们从眼表液中分离和鉴定了近1700种蛋白质，而在之前的人类TF蛋白质组学分析中只记录了几百种蛋白质。因此，目前，本研究是DED患者确定的眼表面的流体蛋白数量最多的。

其次，相对TF来说，这是**个研究人类LF蛋白质组学的报告。随着LF收集方法的发展，我们直接收集来自LG的液体，识别和测量蛋白质和表达水平，并将它们与TF蛋白质组数据进行比较。相应的，在DEPs中，归类于自身免疫/炎症的最重要途径和蛋白，源自LF，不是从TF。

最后，在DED患者和对照组之间,区分了TF和LF的DEPS后，他们被使用更多的个体样品的MRM方法验证。

因此，我们为DED患者确定了敏感性高、特异性强的、新的候选标志物。

干眼症患者泪腺液和泪液蛋白质组学分析