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热敏型UDG酶 5000U
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热敏型UDG酶 5000U 
编号: A018L
规格: 5000µl
储存条件: 液体,存储于-20℃
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15000.00
市场价: 17000.0
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【产品编号】 A018L

【产品名称】热敏型 UDG 酶

【包装规格】100U/1000U/5000U

【产品内容】

组份A018L
UDG¹1000 µl (5 U/µl)
10×Reaction Buffer 7²1ml×20

1 本产品最佳反应温度为 37℃,但在 20-50℃的广泛区间内都有 较佳的活性,95℃ 2min 可以使其完全失活;在超过 100mM K+ 或 Na+的体系中残留活性约为原始活性的 70%,需要增加使用量。

2 200mM Tris-HCl(pH8@25℃),10mM DTT,10mM EDTA。

【产品概述】

美格生物是UDG酶专业生产厂家,热敏型 UDG 酶(尿嘧啶-DNA 糖基化酶)为本实验室自行 培养的细菌中筛选并提取纯化,和来自大肠杆菌的 UNG 类似, 它可水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶-糖苷键、切除尿嘧啶并在 DNA 中产生碱敏感的无碱基位点。这些无碱基位点可通过核酸 内切酶、加热或碱处理进行水解,和来自大肠杆菌的 UNG 不同 之处在于该酶表现出较低的热稳定性,因此更容易使其失活。根 据 DNA 制备方式,UDG 酶可用于实现常见的位点特异性或链特 异性 U-DNA 切割。

【活性定义】

一个单位的定义是在 37℃ 60 分钟内完全降解 1 μg 纯化的 单链含尿嘧啶 DNA(M13)所需的尿嘧啶-DNA 糖基化酶量。

【储存条件及有效期】

本产品于-20℃密封保存,有效期 12 个月。

【特异性】

1. 可在单链和双链 DNA上的 U-DNA 位点水解尿嘧啶糖苷键、 切除尿嘧啶并在 DNA 中产生碱敏感的无碱基位点。

2. 对于单链 DNA 和双链 DNA 均具有活性。

3. 对于 RNA 及天然不含尿嘧啶的 DNA 不具有活性。

4. 对金属离子没有要求,在 EDTA 存在情况下依然具有完全 的活性。但是在超过 100mM K+或 Na+的体系中残留活性 约为原始活性的 70%,需要增加使用量。

热失活:95°C,2 min

【应用】

UDG 酶可用于在已掺入脱氧尿苷酸残基的任何位点切割 DNA。由于 UDG 酶的热不稳定性,该酶的主要应用是预防 PCR3 中的残留污染。

3 本产品在 PCR 中使用量建议为 0.2U-1U/25μl,在一步法 RT-qPCR和55-65℃进行的恒温扩增中建议使用量不超过0.2U/25 μl,在低于 50℃的恒温扩增中(如 RPA、RDA、RAA 等)无法 使用本产品。

【推荐反应体系】

组分体积/质量
10×Reaction Buffer 8 (或其他 PCR buffer)2.5 μL
Taq DNA Polymerase0.25~1μL
Foward Primer(10 μM)0.5 μL
Reverse Primer(10 μM)0.5 μL
模板1 pg-100 ng
2mM dNTPs1 μL
UDG0.2~0.5U
ddH2OUp to 25 μL

4 若体系中单价盐含量超过100mM,建议UDG使用量为0.5~1U。

5 根据不同 DNA 聚合酶对 dUTP 掺入的性能建议 dNTPs 配比为 A:T:C:G:U=2:1:2:2:2 或用 dUTP 完全替代 dTTP。


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