Magigen CRISPR Cas9蛋白 | spCas9 400
CRISPR-Cas9蛋白是一种 RNA 介导的核酸内切酶,可以催化双链 DNA 的特异位点切割。其识别 PAM(Protospacer Adjacent Motif)序列的 NGG 处,在靶序列的 3 个碱基内进行切割。PAM 序列的 NGG 必须连在基因编辑靶标位点之后,位于与 sgRNA 互补的 DNA 的对链上。
Maigen CRISPR/Cas9蛋白与CRISPR/Cas9系统的引导RNA (gRNA)组成部分形成一个非常稳定的核糖核蛋白(RNP)复合物。Cas9 RNP复合物可以在进入细胞后通过核定位信号(NLS)立即定位到细胞核。与mRNA或质粒系统相比,不需要转录和翻译。此外,与其他系统相比,Cas9 RNP复合物可快速从细胞中清除,减少脱靶切割的机会(Kim等,2014)。这种无DNA系统避免了将外源DNA插入基因组的风险,这对于基于基因编辑的疾病治疗非常有用。NLS- cas9 -NLS核酸酶,该酶在蛋白质两端包含一个核定位序列(NLS),以满足研究人员的所有要求(如体外裂解实验、RNP复合转染和微注射)。
CRISPR Cas9蛋白的结构域。CRISPR/Cas9蛋白由六个结构域组成。晶体结构、图示来自PDB文件: 4CMP
【CRISPR Cas9蛋白用途】
CRISPR Cas9a蛋白主要用于CRISPR基因编辑技术,基因治疗,例如基因敲除、敲入、修饰等。
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