不用双链DNA切割，配对的单链Nicking可以触发无缝基因组编辑

精准的基因组编辑涉及 donor DNA与染色体序列的同源重组，通过可编程核酸，打断染色体序列双链DNA。

理想情况下，基因组编辑应该是有效的，明确的，精准的。然而，除了构成潜在的易位起始损伤外，双链DNA断裂（靶向或其他）大多是通过不可预知和突变的非同源重组过程修复的。

在这里，我们发现，以CRISPR-Cas9部件为基础，利用RNA引导核酸酶，针对供体质粒和染色体靶位点，配对的单链DNA的协同形式断裂、或Nicking切刻，会触发无缝同源定向基因，目标针对人类细胞中大的遗传负载，包括多能干细胞。

重要的是，除了大幅降低基因组修改过程中的突变性，这经配对切刻的策略实现了复用，单步，基因打靶，

跟标准的双链DNA断裂法相比，获得精确编辑细胞的频率更高。

Nicking: 指将双链DNA中的一条链切开，而另一条保持完整.

阅读原文

https://www.nature.com/articles/s41467-017-00687-1

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