LAMP扩增技术、CAS蛋白、Taq酶、逆转录酶、RNase HII、基因分型检测


美格生物
MAGIGEN
TEL: 020-31607074   18028069151     Email: info@magigen.com
最新文章
生物技术及产业新闻

利用纳米技术传输CRISPR CAS9蛋白

作者:Kunwoo Lee

广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白、恒温扩增试剂、逆转录酶、侧向层析试纸条,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:

CRISPR Cas9蛋白LAMP恒温扩增试剂逆转录酶.


我对细胞内蛋白传递有着长期的兴趣。我的博士论文主要是研究利用功能化DNA分子在体内传递转录因子的药物。我坚信,如果我们能有效地将蛋白质输送到细胞内,我们就能治愈许多疾病。

在我读博士的时候,著名的CRISPR就在我所在的建筑旁边那栋楼被发现。

当我们听到这个CRISPR/Cas9‍蛋白做的研究时,十分兴奋。我们立刻意识到其治疗的潜力可以转化。因此,我们启动了一个项目,开发在体内输送非病毒crispr cas9蛋白的系统 。

我们决定开发这种CRISPR Case9核蛋白(RNP)的传输工具,通过非病毒传输系统,针对同源性修复(HDR),这在活体动物没有试过。

此外,绝大多数遗传病需要HDR治疗。

参与crispr cas9 RNP工作有一些挑战,如纯化crispr cas9蛋白和细胞活性测定。

刚开始,我测试了由脂质纳米粒和混合了crispr Cas9 RNP + Donor DNA的聚阳离子构成的传输工具,很少有成功的。

我推测这些大分子的不同电荷使它们不能处于同一粒子中。

因此我致力于研究某种方法,可以确保CRISPR Cas9 RNP和供体DNA在同一粒子里。受到Chad Mirkin和Warren Chan的在金纳米粒子方面成果的启发,我意识到金纳米粒子可以结合到DNA和易于纯化,并假设crispr cas9 RNP可以绑定这些颗粒。

然后,我专注于寻找用于涂在这些粒子外面,会触发胞吞和胞内体瓦解的材料。我筛选了大量的化合物,并确定了一种含PASp(DET)的二氧化硅聚合涂层是最佳系统。该涂料的灵感来自于Kazunori Kataoka和Paula Hammond的作品。

这导致了CRISPR-Gold工具的开发,这中工具可以在体外,将crispr cas9 RNP和供体DNA输送进入各种类型细胞。

图1。CRISPR金纳米粒子的示意图。

然后,我们与Irina Conboy实验室合作,研究CRISPR-GOLD在Duchenne型肌营养不良症(DMD)的小鼠模型中的应用。

我们还一起研究是否这些颗粒可以纠正DMD模型鼠抗肌萎缩蛋白的基因突变。

我们和Mike Conboy的第一次实验,发现一个令人惊讶的结果:在单次肌内注射后, 看到一个清晰的HDR展示,抗肌萎缩蛋白基因的基因纠正。

这些合作持续,引发了关于非病毒crispr cas9蛋白输送系统和HDR的潜在治疗应用的非常有价值的讨论 。

我毕业后,我和我的同事们决定在一个初创公司genedit,继续这方面的工作。

genedit是通过CRISPR/Cas9交付开发下一代遗传病治疗的公司。我们进一步改进和优化了聚合物纳米颗粒,

并在各种小鼠模型中进行了测试,最终目的是将这些微粒转化到临床。

CRISPR金纳米粒子的示意图


返回首页


相关阅读

史上最全!CRISPR/Cas9基因编辑方法总结(一)

史上最全!CRISPR/Cas9基因编辑方法总结(二)

利用CRISPR-CAS9在酵母中高通量构建和分析DNA文库   

用RCAS-TVA-CRISPR-Cas9系统编辑体细胞基因组,建立精确的肿瘤模型    

利用CRISPR/Cas9蛋白对面包小麦进行基因组编辑   

CRISPR/Cas9技术防止实验性帕金森综合征   

用CRISPR-Cas9为基础的全基因组技术筛选弓形虫   

用改进的CRISPR Cas9基因编辑技术生产非转基因黄瓜   

通过CRISPR/Cas9介导的反式表观遗传调节,在体内靶向基因激活   

利用CRISPR CAS9基因编辑技术对基因突变进行纠正   

CRISPR SaCas9基因敲入小鼠   

靶向感染部位的抗生素纳米粒增强抗菌效果   

用纳米技术监测多器官癌转移   

利用纳米技术传输CRISPR CAS9蛋白


分享到:
会员登录
登录
我的资料
我的收藏
留言
回到顶部