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美格生物CRISPR基因编辑技术快讯 **期作者：Magigen CRISPR快讯 Vol.1 生物强化西红柿为获取充足维生素D提供新途径-2022/5/23 研究人员发现使用CRISPR-Cas9对西红柿进行基因编辑，可能是持续获取维生素 D 的新方法。通过CRISPR-Cas9基因编辑关闭西红柿基因组中特定基因Sl7-DR2来增加番茄果实和叶子中的维生素D3原的积累，而人皮肤暴露于紫外线下可以将维生素D3原转化为维生素 D3。此方法可以应用于其他植物，如茄子、马铃薯和胡椒等，这为解决全世界将近10亿人缺乏维生素D这一巨大健康问题提供了可能。 来源：Nature Plants https://doi.org/10.1038/s41477-022-01154-6 DIPA-CRISPR，一种简单易操作的昆虫基因编辑方法-2022/5/23 研究人员使用“直接亲本”CRISPR (DIPA-CRISPR) 技术在蟑螂（德国小蠊）中进行基因编辑。实验表明将Cas9 核糖核蛋白 (RNP) 注射到成年雌性蟑螂的血腔中，无需注射到胚胎，就可以有效地在发育中的卵母细胞中引入可遗传的突变。商业化的标准Cas9蛋白可以直接用于DIPA-CRISPR。DIPA-CRISPR的简单和可获取性将极大地扩展基因编辑技术应用到各种昆虫。 来源：Cell Reports Methods https://doi.org/10.1016/j.crmeth.2022.100215 Cas9细胞外囊泡，一种新型基因编辑工具-2022/5/18 研究人员开发出包含Cas9蛋白的细胞外囊泡（EV）作为一种新型基因编辑工具。在HEK293细胞中，每个EV可以加载大约25个Cas9蛋白分子，Cre报告基因和PCSK9基因的基因编辑效率分别为51%和6%。 来源：Journal of Extracellular Vesicles https://doi.org/10.1002/jev2.12225 CRISPR Cas13a辅助放大磁弛豫生物传感用于检测人血清中的miRNA-21-2022/5/29 研究人员使用CRISPR-Cas13a信号放大系统来提高对人血清中特定miRNA检测的灵敏度。该系统采用磁弛豫开关(MRS)的方式直接检测样品中的miRNA，60分钟内检测限为0.22pM。CRISPR/Cas13a系统辅助MRS检测成功实现了复杂样本中miRNAs的准确、简单、快速检测，显示出在潜在的临床应用中检测miRNAs的巨大潜力。 来源：TrAC Trends in Analytical Chemistry https://doi.org/10.1016/j.aca.2022.339853 使用新型SNP快速鉴定炭疽杆菌-2022/5/16 炭疽杆菌是炭疽病的病原体，是一种致命的疾病和潜在的生物威胁。研究人员开发了一种重组酶聚合酶扩增（RPA）和Cas12a结合的快检方法，利用八个新型SNP位点对炭疽杆菌进行快速的即时现场鉴定。这种简单可靠的方法，利于当地医院和公共卫生项目快速检测炭疽杆菌。 来源：Microbiology Spectrum https://doi.org/10.1128/spectrum.02285-21 比例荧光探针:基于CRISPR/cas12的生物传感平台的一种灵敏可靠的报告器-2022/5/3 研究人员设计了一个比例荧光探针作为基于CRISPR/cas12的系统的报告器。实验选择荧光素(FAM)和四甲基罗丹明(TAMRA)作为两种荧光染料，分别标记5端和3端一个短的ssDNA，设计为一个比例荧光探针。当比例探针在480nm处激发时，借助FRET效应，探针发出580nm的TAMRA荧光。激活的Cas12a可以切割双标记的ssDNA，导致TAMRA的荧光降低，FAM的荧光增加。这种双响应荧光探针可以作为基于CRISPR/cas12的生物传感平台的报告器。与传统的TaqMan相比，以比例探针为报告器的CRISPR/cas12生物传感不仅具有更高的灵敏度，而且能够区分和避免假阳性信号。 来源：Analyst https://doi.org/10.1039/D2AN00613H 通过CRISPR Cas12a辅助级联扩增探测低丰度DNA甲基化-2022/5/3 异常的DNA甲基化在肿瘤的发生和转移中起着重要的作用，被认为是一种有价值的非侵袭性癌症生物标志物。本文提出了一种易于操作的CRISPR-Cas系统辅助甲基化(CAM)方法，通过结合滚环（RCA）扩增和CRISPR- cas12a辅助级联扩增，对DNA甲基化进行灵敏检测。该方法具有高灵敏度，可以区分低至0.01%的甲基化水平，为加速基于甲基化癌症诊断和管理铺平了道路。 来源：Analyst https://doi.org/10.1039/D2AN00170E 相关阅读 |