什么是蛋白质邻近连接分析?邻近连接分析,英文Proximity ligation assay,简称PLA, 中文翻译为邻位连接分析或者邻近连接分析技术。邻近连接分析PLA是一种特殊的免疫分析方法,可用于检测目标蛋白,蛋白相互作用等等。邻近连接分析PLA由Fredriksson等人于2002年开发。到目前为止,它已成为一种成熟且普遍适用的免疫组化工具,用于高级和精确的蛋白质分析。图1. A...
RNase HII是什么酶?RNase HII, 中文名:核糖核酸酶HII,是2型核糖核酸酶H。RNase HII的作用RNaseHII酶通过切割核糖核苷酸DNA 5'端, 将RNA从RNA-DNA杂交体中裂解。核糖核酸酶HII具有连接核糖核酸酶活性,在RNA-DNA连接处最后一个核糖核酸肽的5'端切割RNA-DNADNA和RNA-DNARNA双链体。要从从DNA中去除错误结合的核糖,RNa...
核酸内切酶RNase H1 / 核糖核酸酶H1RNase H1酶在底物中需要至少四个含有碱基对的核糖核苷酸,并且不能从由脱氧核糖核苷酸组成的链中去除单个核糖核苷酸。因此,在DNA复制过程中,RNase H1酶不参与冈崎片段RNA引物的处理。RNase H1在单细胞生物中不是必需的;在大肠杆菌中,RNase H1敲除得到温度敏感表型,在酿酒酵母,在应激反应中它们产生缺陷。在包括哺乳动物在内的许...
什么是rhPCR?rhPCR, 英文名RNaseH-dependent PCR,中文名称核糖核酸酶H依赖性PCR。rhPCR是对标准PCR技术的改进。在rhPCR中,引物的3'端设计有一个可移动的扩增区。带阻断引物的扩增依赖于耐高温RNase HII酶在与互补靶序列杂交期间的裂解活性。这种核糖核酸酶RNase HII具有一些有用的特性,可以增强PCR。首先,它在低温下几乎没有酶活性,可以在不...
前言快速准确地诊断疾病是有效治疗和进行长期预防的关键。基于核酸的与疾病相关的生物标志物对于来说诊断是必不可少的,因为DNA或RNA可以从微量样本中扩增出来,这使得它们能够通过互补核苷酸配对进行高度特异性的检测。核酸诊断已经成为各种急慢性疾病的金标准,特别是那些传染病。在传染病爆发期间,正如最近经历的2019年冠状病毒病COVID-19大流行一样,快速准确的核酸检测对有效控制疾病至关重要。核酸...
什么是RNase H?RNase H, 英文名称Ribonuclease H,中文名称核糖核酸酶H,是一个非序列特异性内切酶家族,又称核酸内切酶RNase H。RNaseH通过水解机制催化RNA/DNA底物中RNA的切割。从细菌到古细菌到真核生物, 核糖核酸酶H家族的成员几乎可以在所有生物中找到。RNase H分类和命名法RNase H家族被分为进化相关的组,大致分为RNase H1和RNa...
美格生物最近推出的恒温扩增技术产品LAMP试剂盒 2×LAMP Amplification Mix 是全新一代LAMP扩增技术产品。什么是LAMP扩增技术?LAMP恒温扩增技术的英文名称是:Loop-mediated isothermal amplification, LAMP, 中文名称是:环介导等温扩增反应。LAMP技术的历史LAMP技术是日本学者Notomi在2000年发明的,...
在上一期的文章里,北京理工大学生命学院黄潮勇博士给大家介绍了几种基于CRISPR Cas9技术和同源重组技术的大肠杆菌基因组编辑方法和CRISPR Cas9基因编辑原理 (点击阅读),相信对大家有所帮助。黄潮勇博士做了一些大肠杆菌基因组编辑方面的研究,目前已经以**作者身份发表了两篇相关的方法学文章,赞!。美格君邀请黄潮勇博士分享他的研究成果、经验、心得,欢迎大家与黄潮勇博士交流。黄潮勇博士...
CRISPR Cas9基因编辑是目前流行的基因编辑技术。但是如何把CRISPR Cas9基因编辑方法讲清楚,却不是那么容易的事情。北京理工大学生命学院黄潮勇博士对CRISPR Cas9基因编辑技术进行了深入的研究。今天美格君邀请了黄潮勇博士,就CRISPR Cas9基因编辑技术为大家做一个全面、详细的介绍。大家也可以关注黄潮勇博士的个人微信公众号:[ My BioWorld ],阅读其他相关...
逆转录酶的定义逆转录酶,英文名:Reverse transcriptase,又称反转录酶,RT酶,是RNA定向DNA聚合酶,是一种由逆转录病毒遗传物质编码的酶,对逆转录病毒RNA(核糖核酸)转录成DNA(脱氧核糖核酸)进行催化。这种催化转录是正常细胞将DNA转录成RNA的逆过程,因此被称为逆转录酶和逆转录病毒。逆转录酶是逆转录病毒感染属性的核心,其中一些会导致人类疾病,包括导致获得性免疫缺陷...
如何改造Taq酶?Taq DNA聚合酶是从一种水生栖热菌Thermus aquaticus YT1株分离提取的。YT是一种嗜热真菌,能在70~75℃生长。该菌是1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离的。该酶基因全长2496个碱基,编码832个氨基酸,酶蛋白分子为 94KDa.Taq DNA聚合酶的改造Taq DNA聚合酶发现了几十年,在分子生物学领域具有广泛的应用。研究人员对其不断的...
如何进行RT-PCR实验?今天美格君邀请了Jones博士就这个议题,与大家一起探讨。一、本次RT-PCR实验目的学习和掌握逆转录、RT-PCR基因扩增技术和操作方法,并深刻理解逆转录、RT-PCR基因扩增技术在功能基因克隆与载体构建过程中的重要性。二、RT-PCR实验试剂和材料大肠杆菌DH5a、Trizol试剂、逆转录试剂、PCR相关试剂、PCR产物克隆试剂、氯仿、异丙醇、DEPC水等。三、...
Taq DNA 聚合酶的历史1976年, 科学家A. Chien从美国黄石国家森林公园的火山温泉中一种叫做水生栖热菌(Thermus aquaticus,英文缩写Taq)的嗜热细菌中分离出一种耐热的 DNA聚合酶。这种嗜热细菌生长在70-75℃极富矿物质的高温环境中。因此,Taq DNA聚合酶具有极高的热稳定性,能够承受PCR的热变性步骤。1986年,Kary Mullis发明了PCR技术,...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR Cas13a的发现历史2016年9月,美国加州大学伯克利分校的Jennifer Doudna、Alexandra East-Seletsky和他们的同事们利用CRISPR Cas13蛋白的附带切割活性检测RNA。2017年4月,布罗德研究所大牛张锋团队利用CRI...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR SpCas9蛋白是基因组编辑中***的Cas蛋白,但是科学家一直在发掘新的CRISPR Cas蛋白。CRISPR Cas14蛋白和CasΦ蛋白系列的发现为CRISPR基因编辑提供了更多的可能。目前用于CRISPR基因组编辑的CRIPSR Cas9蛋白SpCas9...
摘要 Bst DNA聚合酶大片段是一种常用的DNA聚合酶,具有高保真、耐高温等独特的特点,能引发链置换反应,是一种重要的DNA多重置换扩增酶。 实验目的设计一种成本低、产量高、扩增活性高的Bst DNA聚合酶大片段表达体系; 探究该Bst酶应用于胃癌石蜡包埋组织基因组DNA扩增条件。 实验方法采用pTWIN1质粒作为载体克隆表达Bst DNA聚合酶大片段,应用几丁质亲和层析柱纯化该酶,使用该...
CRISPR-Cas系统使用RNA引导的Cas蛋白,其大尺寸大约是950到1400个氨基酸,是其特定DNA或RNA靶向活性所必需的。Jennifer A. Doudna提出了一套来自未培养的古细菌的CRISPR-Cas系统,其中包含Cas14,一个非常紧凑的RNA引导核酸酶家族(400到700个氨基酸)。尽管Cas14蛋白的体积很小,但它们能
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR Cas14是一个非常紧凑的RNA引导核酸酶家族。尽管CRISPR Cas14蛋白的体积很小,但它们能够靶向单链DNA(ssDNA)进行切割而不需要限制性的序列要求。此外,CRISPR-Cas14蛋白对靶点的识别触发了单链dna分子的非特异性切割,这种活性可以实...
什么是端粒?端粒,英文名称Telomere, 这一术语由美国二十世纪早期的遗传学家Hermann J. Muller创造,它由来自希腊文字中表示“ 末尾”的词telos 和表示“部分” 的词 meros构成。端粒是存在于细胞内染色体末端的一段具有特殊序列的DNA与蛋白质结合的复合体,端粒短重复序列与端粒结合蛋白一起构成了特殊的“帽子”结构,用于保持染色体的完整性和控制细胞分裂周期。人类细胞的...
CRISPR/Cas蛋白大家好,前面我们讲了CRISPR CAS12a切割原理的**部分,现在我们继续讲CAS12a切割原理的第二部分。CRISPR Cas切割原理二图A. AsCas12a结构域。在域下面标识的数字是每个域的最后一个残基位置。尽管研究表明,**的方式是比较两种核酸酶的DNA监测,但与CRISPR Cas9相反,Cas12a RNP似乎在其对原型间隔区的查询期间,采用间歇性接...
CRISPR/Cas蛋白大家好,我是托马斯,应美格君的邀请,今天想讲一下crispr cas12a的切割原理。CRISPR Cas12a在最近的快速检测应用中崭露头角。那么crispr cas12a是怎样工作的呢?CRISPR Cas12a切割原理大家都已经非常熟悉crispr Cas9这个强大的基因组编辑工具,但其除了crispr cas9这个基因编辑工具以外,还有一些非常出色的Cas核酸...
RT一般有两种含义:1,最常用的意思:RT,reverse transcription,英文"逆转录"的缩写 2,现在也有人这么解释:RT,RealTime, 英文"实时"的缩写。这里我们要讲的是逆转录RT-PCR技术。逆转录RT-PCR原理什么是逆转录RT-PCR技术?RT- PCR,英文名为 Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,...
什么是逆转录酶?OR 什么是反转录酶?逆转录酶,英文名是Reverse Transcriptase,又称反转录酶,RT酶。逆转录酶是RNA指导的DNA聚合酶。反转录酶以RNA为模板,以dNTP为底物,tRNA( 主要是色氨酸tRNA) 为引物,在tRNA 3'-OH 末端上,根据碱基配对的原则,按5'-3'方向合成一条与RNA 模板互补的单链DNA ,这条DNA 单链叫做互补DNA (co...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白、恒温扩增试剂、逆转录酶、侧向层析试纸条,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白、恒温扩增试剂、逆转录酶、侧向层析试纸条重要提示:本方案以张锋实验室的CRISPR Cas13a检测方案为参考,只用于科学研究,不可以用于临床。CRISPR Cas13a与恒温扩增反应体系设置A. 概述述新型冠状病毒COVID-19可以...
2021年第1届中国IVD体外诊断、IVD原材料、零部件、制造流通供应链博览会胜利闭幕。广州美格生物**次参加了CACLP的盛会,美格生物做为专业的CRISPR CAS蛋白、原料酶、恒温扩增POCT检测技术整体服务商,与参会的同行进行了积极的交流,拜访了老朋友,认识了新朋友。大家都认识到,IVD原料国产替代、POCT快速检测产品是大的发展趋势,是一个蓬勃发展的领域,需要大家通力合作,共享IV...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白来自塔夫茨大学的Cavanagh和Garrity教授在CRISPR Cas基因编辑方面有很高的造诣。今天美格君就把Cavanagh和Garrity教授关于CRISPR Cas运行原理、敲除机制的文章整理了一下,大家一起聆听一下大牛们的讲解。CRISPR Cas9基因编辑原理、...
CRISPR 介绍说到基因编辑技术,大家都会联想到CRISPR技术。那么什么是CRISPR?CRISPR 的出现CRISPR系统是一种原核生物的免疫系统,用来抵抗外源遗传物质的入侵,比如入侵的病毒及外源DNA。目前的研究发现,CRISPR系统是在大约40%的细菌和90%的古细菌中发现的一种天然免疫系统。它为细菌提供了获得性免疫,当细菌遭受病毒或者外源质粒入侵时,会产生相应的“记忆”,从而可以...
SHERLOCK检测技术在2017年首次推出时有一些局限性,**代SHERLOCK系统的主要缺点在于它是定性的,而不是定量的。为了提高检测灵敏度,张锋团队对**代SHERLOCK系统进行升级,以改进其检测性能。他们发现cas13变体的一个子集靶向相互排斥的序列。通过使用四种这样的cas13蛋白质, 并为每种蛋白质设计特定的报道基因,创建了SHERLOCKv2系统,该系统一次可以检测多达四种病...
说到SHERLOCK,熟悉福尔摩斯的人都知道,大侦探夏洛克·福尔摩斯,Sherlock Holmes。但今天美格君要讲的SHERLOCK,是一种CRISPR检测技术,Specific High-sensitivityEnzymatic Reporter unLOCKing的缩写,特异性高灵敏度酶促解锁,也可以说是侦探技术,发明人是大牛张锋同志。看来张大侠当年也是一个福尔摩斯迷。2016年6月...
大家好,我是美格君,今天我们要讲的是DETECTR技术,DNA Endonuclease-Targeted Crispr Trans Reporter,一种DNA检测系统.自从CRISPR基因编辑技术被发现以来,风靡全球,CRISPR Cas9基因编辑技术大家已经非常熟悉了,在行业大牛们的引领下,一系列CRISPR CAS家族成员被发现,这包括crispr cas12a. CRISPR CA...