2022年1月30日,中国科学院深圳先进技术研究院合成生物学研究所赵国屏-赵维课题组开发了基于RT-RPA和CRISPR Cas12a联合技术来检测和区分SARS-CoV-2突变体的检测工具:RRCd。该研究团队通过使用优化的RPA引物以及特异的crRNA, 可快速、准确检测单碱基突变、小片段缺失的变异株(包括N501Y、T478K 以及ΔH69-V70等),在Ct<33的临床样品中能达到1...
一直以来,病原体快速和多重检测都是全球卫生安全领域关注的重点方向。在现有检测方法中,二代测序(NGS)可提供病原体详细信息,但检测时间久且成本高;PCR技术可以实现病原体多重检测,但荧光探针发射光谱经常重叠,易混淆目标识别,使单次可检病原体数量受限;而当前被广泛使用的、基于CRISPR技术所研发的高特异和高灵敏分子诊断方法(CRISPR-Dx)也存在多重检测受限和高成本等问题。基于以上挑战,...
一种新的基于CRISPR技术的基因编辑方法可以通过针对包括蟑螂在内的多种昆虫发育中的卵进行基因编辑。目前昆虫基因编辑的方法主要依赖于将基因编辑机器显微注射到早期胚胎中。这使得基因编辑**于那些胚胎容易获得的昆虫。而有的昆虫,例如,蟑螂将受精卵封装在一个硬壳中,这使得它们无法进行微量注射。但日本和西班牙的研究人员发现,当成年雌性昆虫的卵母细胞发育时,可以将Cas9核糖核蛋白RNP做为替代,注射...
由Broad研究所的张峰领导的一个美国研究小组发现了一类全新的转座子编码的RNA引导的DNA核酸酶,这种酶可以用于人类细胞的基因组编辑,是非常有潜力的生物技术。研究人员发现了一种名字叫IscB的蛋白,IscB蛋白可能是RNA引导的核酸内切酶Cas9的祖先,是一个独特的IS200/IS605转座子家族中编码的核酸酶。他们的论文发表在周四出版的《科学》杂志上。研究人员利用进化分析、RNA seq...
一种利用下一代测序NGS读取数据来分析蛋白质-蛋白质相互作用PPI的新方法有可能揭示人类细胞中数千种以前未发现的组合。该方法称为PROPER-seq (protein-protein interaction sequencing, 蛋白质-蛋白质相互作用测序),用RNA条形码标记蛋白质,当可以相互作用的蛋白彼此接近时,RNA条形码形成嵌合序列。“我们用PROPER-seq方法扫描了大约150...
合成生物学利用定制生物电路技术,设计出模块化生物传感器、逻辑电路、输出设备, 实现了对生物系统的全新控制。与此同时,无线技术、可穿戴电子产品、智能材料和具有新机械、电学和光学特性的功能纤维的最新发明催生了更为复杂的生物传感系统。无细胞合成生物学反应是独立的非生物化学系统,具有有效转录和翻译所需的所有生物分子组分。这样的系统可以利用多孔基材、冷冻干燥成耐储存的形式,实现稳健的分布、储存和使用,...
CRISPR Cas系统目前被用来开发基于核酸的分子诊断工具,这是一种快速、灵敏的病原体检测方法。然而,大多数基于CRISPR-Cas的检测方法缺乏定量检测的能力。在这里,新加坡MIT研究院的研究人员开发了一种热启动快速数字CRISPR Cas检测方法(WS-RADICA, Warm Start RApid DIgital Crispr Approach),它利用环介导LAMP扩增技术、C...
为何新冠病毒传播如此之快?SARS-CoV-2新冠变异病毒的出现,表明新冠病毒对宿主选择压力的适应导致了更有效的传播。在英国,新冠病毒COVID19的变异毒株B.1.1.7传播的非常迅速,这种变异新冠病毒也被称为α病毒(阿尔法病毒),它可能与它抑制人体初始免疫反应的能力有关。 变异株B.1.1.7已经风靡全球,成为SARS-CoV-2的主要形式。一项针对SARS-CoV-2细胞感染的研究表明...
摘要CRISPR Cas12a(Cpf1)可以反式切割ssDNA,该特征已被广泛用于核酸检测。在这里,我们介绍了一种新型的Cas12a报告基因,G-triplex(G3)和一种称为G-CRISPR的高灵敏度生物传感器。我们证明CRISPR Cas12a可以在约10分钟内反式切割G3结构,利用这种切割诱导的高级结构破坏方式,G3可以作为出色的报告子。G3报告基因将检测灵敏度提高了20倍,对于未...
美格生物最近推出的恒温扩增技术产品LAMP试剂盒 2×LAMP Amplification Mix 是全新一代LAMP扩增技术产品。什么是LAMP扩增技术?LAMP恒温扩增技术的英文名称是:Loop-mediated isothermal amplification, LAMP, 中文名称是:环介导等温扩增反应。LAMP技术的历史LAMP技术是日本学者Notomi在2000年发明的,...
在上一期的文章里,北京理工大学生命学院黄潮勇博士给大家介绍了几种基于CRISPR Cas9技术和同源重组技术的大肠杆菌基因组编辑方法和CRISPR Cas9基因编辑原理 (点击阅读),相信对大家有所帮助。黄潮勇博士做了一些大肠杆菌基因组编辑方面的研究,目前已经以**作者身份发表了两篇相关的方法学文章,赞!。美格君邀请黄潮勇博士分享他的研究成果、经验、心得,欢迎大家与黄潮勇博士交流。黄潮勇博士...
CRISPR Cas9基因编辑是目前流行的基因编辑技术。但是如何把CRISPR Cas9基因编辑方法讲清楚,却不是那么容易的事情。北京理工大学生命学院黄潮勇博士对CRISPR Cas9基因编辑技术进行了深入的研究。今天美格君邀请了黄潮勇博士,就CRISPR Cas9基因编辑技术为大家做一个全面、详细的介绍。大家也可以关注黄潮勇博士的个人微信公众号:[ My BioWorld ],阅读其他相关...
逆转录酶的定义逆转录酶,英文名:Reverse transcriptase,又称反转录酶,RT酶,是RNA定向DNA聚合酶,是一种由逆转录病毒遗传物质编码的酶,对逆转录病毒RNA(核糖核酸)转录成DNA(脱氧核糖核酸)进行催化。这种催化转录是正常细胞将DNA转录成RNA的逆过程,因此被称为逆转录酶和逆转录病毒。逆转录酶是逆转录病毒感染属性的核心,其中一些会导致人类疾病,包括导致获得性免疫缺陷...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白、恒温扩增试剂、逆转录酶、侧向层析试纸条,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白、恒温扩增试剂、逆转录酶、侧向层析试纸条摘要基于CRISPR的核酸检测是一种新兴的分子诊断技术。然而,这些方法一般需要几十分钟至数小时的时间,扩增提高了检测灵敏度,但是可能导致扩增误差。在这里,我们通过结合基于CRISPR-Cas13蛋...
图1.上一篇文章提到Rikiya Watanabe团队设计了一种基于CRISPR的无需扩增RNA检测的SATORI方法。想阅读上篇文章?请点击:无需扩增的CRISPR Cas13 RNA病毒检测技术SATORI是怎么构建的呢?Rikiya Watanabe团队的构想非常巧妙。SATORI采用了光刻技术,制作了精密的微腔阵列器件,达到了分子检测的标准。利用光刻技术制作微腔阵列器件采用常规光刻技...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR Cas13蛋白为肌营养不良症患者带来福音什么是肌营养不良症?肌营养不良症症状,英文名:Facioscapulohumeral muscular dystrophy,简称:FSHD,是一种遗传性肌肉疾病,受其影响最严重的是脸,肩,上臂等部位的肌肉。FSHD肌营养不...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白、恒温扩增试剂、逆转录酶、侧向层析试纸条,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白、恒温扩增试剂、逆转录酶、侧向层析试纸条通过遗传方式改变基因表达会带来许多新的发现和新的治疗方法。CRISPR基因编辑技术的应用,对生命科学和人类生活产生了积极而重大的影响。例如,CRISPR Cas9系统,Cas9蛋白在gRNA的引导...
Taq DNA 聚合酶的历史1976年, 科学家A. Chien从美国黄石国家森林公园的火山温泉中一种叫做水生栖热菌(Thermus aquaticus,英文缩写Taq)的嗜热细菌中分离出一种耐热的 DNA聚合酶。这种嗜热细菌生长在70-75℃极富矿物质的高温环境中。因此,Taq DNA聚合酶具有极高的热稳定性,能够承受PCR的热变性步骤。1986年,Kary Mullis发明了PCR技术,...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白对于COVID19新冠病毒核酸检测,很少有端到端的解决方案能够在不牺牲灵敏度的前提下满足快速可扩展性和低成本的要求。这里,美格君介绍一个由美国加利福尼亚大学Maxwell Z. Wilson博士团队开发的一种基于CRISPR Cas13a蛋白的SARS-CoV-2 RNA检测...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白利用恒温扩增和CRISPR Cas蛋白酶对报告分子的附带裂解功能进行病毒核酸检测是定量PCR的一种很有前途的替代方法。有几种不需要特殊仪器的RNA检测技术,包括逆转录-重组酶聚合酶扩增(RT-RDA、RPA)和逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)。RT-RDA、RPA和RT...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR Cas13a的发现历史2016年9月,美国加州大学伯克利分校的Jennifer Doudna、Alexandra East-Seletsky和他们的同事们利用CRISPR Cas13蛋白的附带切割活性检测RNA。2017年4月,布罗德研究所大牛张锋团队利用CRI...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR SpCas9蛋白是基因组编辑中***的Cas蛋白,但是科学家一直在发掘新的CRISPR Cas蛋白。CRISPR Cas14蛋白和CasΦ蛋白系列的发现为CRISPR基因编辑提供了更多的可能。目前用于CRISPR基因组编辑的CRIPSR Cas9蛋白SpCas9...
摘要 Bst DNA聚合酶大片段是一种常用的DNA聚合酶,具有高保真、耐高温等独特的特点,能引发链置换反应,是一种重要的DNA多重置换扩增酶。 实验目的设计一种成本低、产量高、扩增活性高的Bst DNA聚合酶大片段表达体系; 探究该Bst酶应用于胃癌石蜡包埋组织基因组DNA扩增条件。 实验方法采用pTWIN1质粒作为载体克隆表达Bst DNA聚合酶大片段,应用几丁质亲和层析柱纯化该酶,使用该...
逆转录酶,又称反转录酶,英文名:Reverse transcriptase,RT酶什么是LINE-1?LINE, 是英文long interspersed nuclear element的缩写,中文是长分散核元件。在高等真核生物基因组中,长分散核元件1(LINE-1)逆转座子代表了一个大的重复基因组元件家族。他们使用逆转录酶(RT酶)进行转座,并将其编码为ORF2p产物的一部分。在动物模型中...
CRISPR-Cas系统使用RNA引导的Cas蛋白,其大尺寸大约是950到1400个氨基酸,是其特定DNA或RNA靶向活性所必需的。Jennifer A. Doudna提出了一套来自未培养的古细菌的CRISPR-Cas系统,其中包含Cas14,一个非常紧凑的RNA引导核酸酶家族(400到700个氨基酸)。尽管Cas14蛋白的体积很小,但它们能
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR Cas14是一个非常紧凑的RNA引导核酸酶家族。尽管CRISPR Cas14蛋白的体积很小,但它们能够靶向单链DNA(ssDNA)进行切割而不需要限制性的序列要求。此外,CRISPR-Cas14蛋白对靶点的识别触发了单链dna分子的非特异性切割,这种活性可以实...
什么是端粒?端粒,英文名称Telomere, 这一术语由美国二十世纪早期的遗传学家Hermann J. Muller创造,它由来自希腊文字中表示“ 末尾”的词telos 和表示“部分” 的词 meros构成。端粒是存在于细胞内染色体末端的一段具有特殊序列的DNA与蛋白质结合的复合体,端粒短重复序列与端粒结合蛋白一起构成了特殊的“帽子”结构,用于保持染色体的完整性和控制细胞分裂周期。人类细胞的...
大家好,前面我们讲了CRISPR CAS12a切割原理的**部分,现在我们继续讲CAS12a切割原理的第二部分。CRISPR Cas切割原理二图A. AsCas12a结构域。在域下面标识的数字是每个域的最后一个残基位置。尽管研究表明,**的方式是比较两种核酸酶的DNA监测,但与CRISPR Cas9相反,Cas12a RNP似乎在其对原型间隔区的查询期间,采用间歇性接触方式跟踪DNA。CRI...
大家好,我是托马斯,应美格君的邀请,今天想讲一下crispr cas12a的切割原理。CRISPR Cas12a在最近的快速检测应用中崭露头角。那么crispr cas12a是怎样工作的呢?CRISPR Cas12a切割原理大家都已经非常熟悉crispr Cas9这个强大的基因组编辑工具,但其除了crispr cas9这个基因编辑工具以外,还有一些非常出色的Cas核酸酶编辑工具。V型cris...
广州美格生物提供全系列的CRISPR Cas蛋白,用于基因编辑、快速检测。想了解详情,请点击:CRISPR Cas蛋白CRISPR-Cas9基因编辑系统是基因组编辑的热点。这种CRISPR Cas9内切酶用于基因沉默和敲除实验,以及转录激活和抑制。CRISPR Cas9基因编辑系统由两个部分组成:一个向导RNA(gRNA)和一个Cas9蛋白酶。crispr cas9蛋白对基因组DNA靶点的...