基因编辑技术CRISPR/Cas系统基于CRISPR/Cas的方法为利用基因治疗和免疫疗法治疗癌症提供了一条巧妙的途径。癌症治疗方法中使用的CRISPR/Cas系统主要基于Cas核酸酶（Cas9、Cas12a和Cas13a）及其同源物。CRISPR/Cas9系统通常被用作大多数物种的基因工程工具。Cas9是一种crRNA引导的核酸内切酶，包含两个称为RuvC和HNH的结构域，参与切割双链DN...

猪流感猪流感的预防和检测猪瘟与猪流感一样吗？猪流感和非洲猪瘟都会给猪场造成很大的麻烦，但猪流感和非洲猪瘟不是一样的疾病，对猪场影响也不同，处理方式也不一样。在冬季，猪流感和呼吸道疾病是养殖场的常见疾病。如何区分和诊断猪流感和非洲猪瘟是养猪户非常头痛的问题。如何区分和诊断猪流感和非洲猪瘟？猪流感和非洲猪瘟的区别1、 首先，猪流感和非洲猪瘟的流行特征有不同，这点很重要1). 猪流感来得快去得快，...

病毒包装腺相关病毒AAV包装流程自然界中的天然野生型腺相关病毒的基因组上存在Rep和Cap基因，而实验用的AAV载体，是在野生腺相关病毒的基础上经过人工改造的质粒，基因组上已经去除了Rep和Cap基因，因此也叫重组腺相关病毒（recombinant AAV，rAAV）。在没有特别指出的时候，简称AAV一般指已经改造过的AAV载体。如何进行rAAV病毒包装？rAAV载体的生产流程rAAV重组腺...

病毒腺相关病毒AAV●什么是腺相关病毒腺相关病毒英文全称是 Adeno-Associated Virus，简称AAV，AAV是一种小型无包膜病毒，属于细小病毒科。AAV病毒的发现1965年，研究人员在猿猴腺病毒15型制剂中发现了一种病毒污染物，这就是后来被称为AAV的腺相关病毒。从那时起，AAV已被成功开发成治疗载体，Glybera（alipogene tiparvovec）成为**个被授权...

酶的活性酶热失活什么是热失活？热失活，英文是Heat inactivation，也叫热灭活，是一种化学现象，特别是在蛋白质和酶的领域中较为常见。它指的是蛋白质或酶在高温条件下失去其活性或功能的过程。这种失活通常发生在蛋白质或酶的最适反应温度以上。热失活是停止限制性核酸内切酶反应的便捷方法。例如，在65°C下孵育20分钟，可以使大多数**孵育温度为37°C的限制性核酸内切酶失活。在65°C下不...

基因编辑技术表观遗传编辑器CRISPR基因编辑 vs 表观遗传编辑CRISPR基因编辑技术因为能够高效地在基因组特定位点插入或移除基因，或修复致病基因突变，成为许多遗传疾病治疗的最新选择。CRISPR技术在基因编辑的过程中会将DNA双链切开，然后对其进行修复，在这个过程中可能导致出现未知突变、脱靶效应和基因表达不可控等副作用。因此，科研人员开始寻求在使用CRISPR过程中不打开DNA双链的方...

遗传学表观遗传与健康人的表观遗传会改变吗？随着年龄的增长，人的表观遗传会发生变化，这既是正常发育和衰老的一部分，也是对人的行为和环境的反应。表观遗传现象发生在什么时期?表观遗传现象普遍存在于生物体的生长、发育和衰老的整个生命活动过程。表观遗传是如何改变的？表观遗传和人的成长表观遗传变化在人出生之前就开始了。人所有的细胞都有相同的基因，但外观和行为却不同。随着人的成长和发育，表观遗传有助于确定...

遗传学表观遗传学人的基因对健康起着重要作用，但人的行为和所处的环境也是如此，比如你吃什么，你的身体活动程度如何。与遗传变化不同，表观遗传变化是可逆的，不会改变人的DNA序列，但它们可以改变人的身体读取DNA序列的方式。什么是表观遗传？表观遗传是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下, 基因功能发生了可遗传的变化, 并最终导致了表型的变化。什么是表观遗传学？表观遗传学，英文是Epigenet...

分子技术DNA和RNA的区别●DNA是什么？DNA, 中文是脱氧核糖核酸，DNA的英文全称是deoxyribonucleic acid。DNA是生物细胞内含有的四种生物大分子之一核酸的一种。DNA携带有合成RNA和蛋白质所必需的遗传信息，是生物体发育和正常运作必不可少的生物大分子。DNA由脱氧核苷酸组成的大分子聚合物。脱氧核苷酸由碱基、脱氧核糖和磷酸构成。其中碱基有4种:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤...

DNA/RNADNA和RNA的区别全面比较 DNA 与 RNA 结构和功能的区别DNA与RNA的结构功能的区别主要有以下几个方面1、组成不同2、位置不同3、结构功能不同4、复制与转录不同1、DNA和RNA的组成不同DNA的组成是： 脱氧核糖核苷酸， 它又是由脱氧核糖和核苷酸组成的; RNA是由核糖核苷酸组成的， 核糖核苷酸是由核糖和核苷酸组成的。核苷酸又是由碱基、 戊糖、 磷酸组成， 构成 ...

分子检测管家基因/奢侈基因/结构基因的概念根据功能和活性的不同，基因可以分为以下两大类：1、管家基因或者是 组成型基因Constitutive Genes2、奢侈基因或者是 非组成型基因Nonconstitutive Genes3、结构基因（顺反子）Structural Genes (Cistrons)◆什么是管家基因管家基因，英文是Housekeeping Genes，又称持家基因、内标基...

分子检测内标基因核酸检测试剂盒基本都已经加入“内标”，主要分为“外源性内标”和“内源性内标”两种，下面我们结合实验室经常遇到的“样本内标扩增异常”情况，在实际检测中，我们经常会遇到的“样本内标扩增异常”情况，如何解决曲线异常的问题？在质控满足要求时，如何正确的认识核酸检测中的内标基因?常见异常内标曲线及可能原因分析➢外源性内标的异常内标曲线1. 靶基因和内标均无扩增常见原因：无法明确是否存在...

分子检测技术内标基因在新冠病毒检测中，核酸检测技术准确率非常高，是确认新冠肺炎感染者确诊的"金标准"。但是，就是最准确的核酸检测技术也会出现假阴性现象。为了降低假阴性的出现，在核酸检测试剂加入内标基因的检测，通过检测内标基因，来质控采样含量、核酸提取、核酸扩增过程。什么是内标？内标，英文是 internal control，是指内部检测标准，通过内标的设置，来监控核酸提取和扩增过程，防止假阴...

分子检测技术荧光通道的区别什么是荧光通道？荧光通道指的是针对每一种荧光的检测器，比如在一个实验管中设计多个颜色的荧光反应，分别针对多个靶基因。每个颜色需要一个检测器来检测荧光信号的强弱，每一个针对不同颜色的检测器，就是一个通道。荧光基团的种类和用途荧光基团类型主要有以下几种：FITCFITC（ fluorescein isothiocyanate），具有**性标记生物分子的独特检测性能，可用...

PCR技术PCR反应体系设计PCR反应涉及多种原料成分。PCR原料成分的多少、分配比例会影响PCR反应的效果。对PCR各种原料进行科学的比例分配是一个需要不断摸索、改进的过程。通过不断的测试探索，才可能找到**的反应体系。PCR原料的控制1. PCR引物量每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引...

PCR技术基础PCR引物设计基础引物设计是PCR实验的必备步骤，PCR实验的成功与否跟引物设计有很大的关系。如何设计高质量的引物是从生物研究的小白到大牛都必须关注的。图1. PCR扩增原理图      美格生物如何正确设计引物？一、引物设计的基本原则1. 用于PCR反应的引物需要两条，分别设在被扩增目的的片段的两端，并分别与模板正负链序列互补，避免出现二聚体、发夹结构等2. 引物的长度一般以...

PCR技术PCR常见问题及解决办法01 PCR假阴性问题 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。如何解决PCR的假阴性问题?寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①模板中含有杂蛋白质。②模板中含有Taq酶抑制剂。③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白。④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模板核酸变性不彻底。在酶和引...

PCR技术PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR作为生物专业的学生，PCR实验是必不可少的内容。但是对于许多新同学来说，关于PCR的专业术语有很多，比如PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR、Real-Time PCR等等。这一些列的PCR有什么不同？今天，美格君就和大家简单介绍一下。一、PCR是什么意思？PCR的中文意思是聚合酶链反应。它是英文P...

PCR技术在PCR实验中出现PCR污染是一个很麻烦的事情。PCR 反应的**特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性， 但令人头痛的问题是易污染， 极其微量的污染即可造成假阳性的产生。PCR污染是怎样产生的？PCR污染原因1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染， 或标本放置时， 由于密封不严溢于容器外， 或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染; 标本核酸模板在提取过程中， 由于吸样...

PCR技术什么是PCR假阴性？PCR假阴性, 英文是PCR false-negative, 是指不出现特异扩增带。为什么会产生PCR假阴性？PCR假阴性的原因可能有：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及活性④PCR循环条件。 寻找原因亦应针对上述环节进行分析...

PCR技术PCR实验中的引物二聚体问题解答问：做RT-PCR电泳后发现有引物二聚体和杂带是什么原因？应该怎样处理才能解决这个问题？答：1、 引物二聚体的产生原因比较多， 其中很重要的一个就是引物自身的原因， 也就是设计的引物特异性不好， 不能有效的和模板进行结合， 而出现引物自身配对结合的情况导致二聚提的出现； 其次还可能是 PCR 体系及反应条件的问题， 如果 PCR 体系中引物、 镁离子...

病毒学研究多分体现象、多分体基因组和多分体病毒多分体病毒、多分体基因组、多分体现象非常神奇。前面4节美格君介绍了法国植物病理学家Anne在这方面的一些研究成果，下面我们继续分享Anne教授对多分体病毒、多分体基因组的见解。5、宿主内部移动当病毒从一个细胞移动到另一个细胞、或跨越很远的距离、系统地定殖宿主时，转移其所有的基因组信息的问题成为区分多分体病毒与分段病毒和单体病毒的真正问题。事实上，...

基因编辑技术基因编辑工具/碱基编辑器如何精准、高效地对基因组进行修饰是生命科学领域研究的重要目标，而CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术成为实现该目标的最强工具。传统的CRISPR/Cas9技术通过在靶点处产生DNA双链断裂(DSB)，从而诱发细胞内的同源重组(HR)和非同源末端连接(NHEJ)修复途径，进而实现对基因组DNA的定点敲除、替换、插入等修饰。然而，DSB引发的DNA修复很难...

病毒学研究多分体现象、多分体基因组和多分体病毒多分体病毒的发现，多分体现象、多分体基因组的进化和生存机制吸引了科学家的关注。前面几节美格君介绍了法国植物病理学家Anne在这方面的一些研究成果，下面我们继续多分体病毒、多分体基因组的神奇之旅。4、病毒包装/包壳病毒生命周期的这一步骤在本综述中非常重要，因为它显着区分了分段病毒和多分体病毒。这些似乎是相反的策略：在前者中，病毒将其整个遗传信息包装...

病毒学研究多分体现象、多分体基因组和多分体病毒1960年代，随着多分体病毒的发现，多分体现象、多分体基因组的许多秘密吸引了众多科学家的注意，引申出了许多观点与推测。美格君在前面的文章已经分享了法国植物病理学家Anne的部分观点，这里继续介绍：3、多分体病毒的基因表达为了在非常小的基因组中编码所有必需的基因和功能，并调节其协调表达，病毒具有极大的创造性。特别是，病毒必须处理宿主细胞机制，这通常...

病毒学研究多分体现象、多分体基因组和多分体病毒多分体病毒和多分体基因组的发现改变了病毒传播的经典理论，即病毒完全感染个体细胞并在其中复制。➢为什么会有多分体现象？➢多分体病毒是如何进化的？➢多分体基因组有哪些优势？至今为止，虽然我们对多分体病毒已经有了一些研究，但对对多分体病毒和多分体基因组的秘密还不太了解。为了让我们对多分体病毒有更多的了解，美格君先简要回顾一下病毒生命周期的连续步骤，试图...

基因组学多分体基因组多分体基因组是什么？多分体基因组，英文是 multipartite genome，又称多组分基因组。多分体基因组是一种非常特殊的基因组，最早发现在病毒基因组中。科学家发现有的病毒的基因组分布在不同的核酸链上，分别包装在不同的病毒粒体里。由于遗传信息分开了，单独一个粒体不能侵染，必需是一组几个同时侵染才能全部表达遗传特性。这种分段的基因组被称为多分体基因组，或者多组分基因组...

RT-PCR/分子诊断常用酶逆转录酶的作用和应用➢逆转录酶在进化中的角色俄勒冈州的瓦莱里安·多尔贾（ValerianDolja）认为，病毒由于其多样性，在细胞生命的发展中发挥了进化作用，其中，逆转录酶起着核心作用。➢逆转录酶的结构逆转录酶包括RNA依赖性DNA聚合酶和DNA依赖性DNA聚合酶，它们共同进行转录。除了转录功能外，逆转录病毒逆转录酶还具有属于RNase H家族的结构域，这对其复制...

RT-PCR/分子诊断常用酶逆转录过程和逆转录病毒的逆转录➢什么是逆转录？逆转录，英文是reverse-transcription，是逆转录酶用RNA模板生成互补DNA (cDNA)的过程。逆转录的概念最初不被接受，因为它与分子生物学的中心教义相矛盾，即DNA被转录成RNA，然后被翻译成蛋白质。然而，1970年，当科学家Howard Temin和David Baltimore发现了负责逆转录...

RT-PCR/分子诊断常用酶逆转录酶的性能和功能逆转录酶，英文是Reverse Transcriptase，简称RT酶，是一种用于从RNA模板生成互补DNA (cDNA)的酶，这一过程被称为逆转录，RT酶是cDNA合成和RT-qPCR反应中的核心成分。它主要与逆转录病毒有关。然而，非逆转录病毒也使用逆转录酶，例如，乙型肝炎病毒，是dsDNA 逆转录病毒，而逆转录病毒是ssRNA病毒。逆转录酶...