恒温扩增/等温扩增技术
Magigen RDA恒温扩增技术
什么是RDA恒温扩增?
RDA, Recombinase Depend Amplification, 是以重组酶介导的快速等温扩增技术。
目前市场上的等温扩增技术主要有RDA、LAMP、RPA,主要用于POCT等即时快检产品开发。
【产品名称】RDA Basic 核酸扩增试剂盒(液体型)
【产品编号】B005M
【包装规格】48 T
【RDA价格】1780元
【产品内容】
产品组成 | 数量 |
AR Buffer | 1 管 |
B Buffer | 1 管 |
RDA Basic 酶反应液 | 1 管 |
阳性对照引物探针 | 1 管 |
阳性对照 DNA 模板 | 1 管 |
使用说明书 | 1 份 |
【RDA用途】本产品可用于核酸DNA的快速检测。RDA试剂是核酸等温扩增荧光型预混液,适用于DNA样本。
【RDA恒温扩增技术原理】RDA(Recombinase-dependent amplification),即重组酶依赖扩增技术,在恒定温度下快速实现对靶标的扩增,并利用特殊设计的特异性荧光标记探针,可在仪器上实时观测扩增反应过程,5-30 min 完成反应。反应产物通过琼脂糖凝胶电泳或其他检测方法进行分析。
【RDA恒温扩增优势】
RDA Basic试剂套件包含了多种酶组份,可以对目标DNA模板进行快速等温扩增,速度快,时间可以快至10分钟以内,灵敏度高,经过良好设计,可以检测到低至10个拷贝以内。利用RDA Basic产品,客户可以开发出合适的、低成本的快速检测产品。
产品优势:
a. 5-15分钟内获得检测结果,实现真正意义『快检』;
b. 30℃-42℃常温恒温反应,无需热循环过程,无需另购其他昂贵设备;
c. 灵敏度高,可实现单分子检测灵敏度 ;
d. 采用液体形式试剂。
【储存条件及有效期】本产品于-20℃避光密封保存,有效期 12 个月。
【适用仪器】水浴锅、金属浴,或其他能提供恒定温度的仪器或设备。
【RDA恒温扩增步骤】
1 DNA 提取:请参考商品化试剂盒的方法提取核酸 DNA,推荐使用离心柱或磁珠法。
2 检测方法:
2.1 取出试剂盒组分,融化后混匀,备用;RDA-exo 酶反应液置于冰上备用。
2.2 按下表在离心管中制备反应混合物,混匀,瞬离后分装。
成分名称 | 单个反应加入量(μL) |
ddH2O | 16.5 |
AR Buffer | 20 |
引物 F (10 μM) | 2 |
引物 R (10 μM) | 2 |
RDA Basic 酶反应液 | 5 |
总体积 | 45.5 |
2.3 在八连管盖上加入 2.5 μL B Buffer,在反应液中加入 2 μLDNA 模板或 ddH2O。离心后混匀,瞬离,立即进行加温反应。
注意:加入 B buffer 后,RDA-exo 反应会立即开始。
2.4 将反应管放入到水浴锅或金属浴,或其他能提供恒定温度的设备中,设置温度 39℃,记录反应时间 30 min。
试剂盒阳性对照反应
按下表制备反应混合物,以阳性对照品为模板,其余操作同上。
成分名称 | 单反应加入量(μL) |
ddH2O | 16.5 |
AR Buffer | 20 |
阳性对照引物 | 4 |
RDA Basic 酶反应液 | 5 |
总体积 | 45.5 |
3 产物分析
以电泳方法为例。
3.1 产物处理及电泳:由于RDA反应体系中酶含量较高,取产物直接电泳可能检测不到正确条带,或检测不到条带,建议使用PCR产物纯化试剂盒或酚氯仿纯化、或蛋白酶K消化处理,再取样2-5μL电泳。
3.2 电泳结果分析:观察条带是否与目的片段一致。试剂盒阳性对照的扩增片段大小为133bp。
【RDA恒温扩增注意事项】
1. 本产品仅供科研使用,使用前请仔细阅读本说明书。
2. 冰上配制反应体系,将有利于实验重复性。应尽快完成操作和检测,以免检测效率受到影响。
3. 在同一核酸提取方法下,不同样品类型,所提取的核酸含量和纯度会有差异,导致扩增效率不同。
4. 如果试剂保存、配制或运输不当,导致试剂检测性能下降,则会出现假阴性的结果。
5. 如果出现实验室环境、试剂、仪器污染,或样本间交叉污染的情况,则会影响检测结果准确性,出现假阳性结果。
6. 请严格按照基因扩增实验室的管理规范进行实验操作。
7. 实验结束后,检测过程中所产生的废弃物应按照相关规范进行处理。
购买注意事项:
1. RDA核酸恒温扩增预混液价格
RDA核酸恒温扩增预混液的价格会随外汇汇率的波动而变化,请以实际价格为准。
2. RDA核酸恒温预混液运输
RDA核酸恒温试扩增剂盒价格是产品含税价格。没有包含运费等其他费用。有些产品需要采用干冰运输方式,请在购买前咨询运费、是否支持干冰运输等事宜。
3. RDA核酸恒温试扩增剂盒图片仅供参考,请以实际为准。
咨询热线:18027152056
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