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最新高转染效率低毒性RNP递送工具-Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles Kit作者:Magigen 全新RNP递送工具 Nanoparticles(CRISPR Cas9/sgRNA NPs)for 293T细胞等有效地将Cas9/sgRNA RNP传递到广泛的细胞类型, 例如 293T细胞等。 Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles(Cas9/sgRNA NPs)是什么?Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles(Cas9/sgRNA NPs)是由Cas9蛋白、客户设计的sgRNA和颗粒骨架蛋白共同表达产生的,这些蛋白通过自组装介导Lumiere NPs从生产细胞的细胞膜上释放出来。Lumiere NPs被分泌出来,它们就可以被收获、浓缩,并用于感染靶细胞。NPs被靶细胞识别并融合后,活性Cas9/sgRNA RNP复合物被进一步运输到细胞核进行高效的基因编辑。 Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles(Cas9/sgRNA NPs)是如何工作的?1. 将纯化的靶点质粒(稀释至750μl)添加至Cas9/sgRNA NPs Packaging Mix 1中,涡旋混匀; 2. 将混合的Mix1加入到Cas9/sgRNA NPs Packaging Mix 2中; 3. 将上述混合物放在培养皿中与研究的细胞(例如,293T细胞)一起培养; 4. 48-72小时后,离心5min,收集细胞培养上清。 图1. Lumiere CRISPR/Cas9 Nanoparticles(Cas9/sgRNA NPs)工作流程图 Lumiere Cas9/sgRNA NPs有哪些优势?产品优势 . 细胞转染效率极高,可达50-100%, 包括难转染的细胞 · NPs不会受限于AAV的包装大小 . 不会出现LV的随机整合问题 · 低细胞毒性,不会影响后续细胞的活力和生长 · 递送范围广,能满足绝大部分细胞类型的递送,例如:293T细胞,Hepa1-6 Cell, Primary hLESC, RD Cell, K562 Cell等。 · 能够实现RNP高效的递送效率 · 以递送RNP复合物为主,大大降低了脱靶风险和整合风险 · 优化过的配比能实现高效的包封率,可在实验室实现包装生产 想提高细胞转染效率?想减少细胞毒性?NPs非常适合比较难转染的细胞,细胞转染效率高达50-100%,例如一些肿瘤细胞、原代细胞、干细胞,也适用于细胞比较珍贵、对毒性要求特别低的场景。 另外,CRISPR-cas9编辑基因多多少少会有一些脱靶的情况,如果对编辑过的细胞的遗传背景干净度要求高,例如,想要一个293T细胞中敲除某个基因用来做测序,进行大数据分析,这时研究人员就可能希望其他基因不会受到CRISPR-cas9的影响,或者想将这种影响降到最低,这种场景NPs也非常适合。 Lumiere Cas9/sgRNA NPs适合哪些领域?适用领域 ·原代细胞编辑 ·背景更加干净的基因编辑细胞系 ·干细胞编辑 ·其他动物来源的细胞 Lumiere Cas9/sgRNA NPs的敲除效率如何?图2 不同细胞类型中的敲除效率 产品规格
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